PCR仪工作原理利用升温使DNA变性,PCR仪基因扩增仪,在聚合酶的作用下使单链复制成双链,进而达到基因复制的目的。PCR的反应包括三个主要步骤分别是:
1. Denaturation 2. Annealing of primers,3. Extension of primers。 所谓 Denaturing乃是将DNA加热(至90~95℃)变性,荧光定量PCR仪, 将双股的DNA加热后转为单股DNA以做为复制的模板. 而Annealing 则是令 Primers于一定的温度下(冷却至55~60℃)附着于模板DNA两端。 最后在DNA聚合酶e.g. Taq-polymerase 的作用下(加热至70~75℃)进行引物的延长 Extension of primers及另一股的合成。PCR的较早设想核酸研究已有100多年的历史,二十世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术,Korana于1971年较早提出核酸体外扩增的设想:“经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。
实验室中使用的仪器一般都是很精密的,所以在使用的时候,也要对其进行保养维护,今天君意生物的小编就和大家一起来了解一下如何保养PCR仪:
1. 使用前预热
老款的PCR仪的性能比不上新款仪器,PCR仪,使用前需要进行预热,不仅对仪器维护有好处,PCR仪价格,还能节约实验时间。新款的仪器升温快,但还是建议能在进行实验前预热2min,这样可以有效延长仪器的使用寿命。
2. 定期运行维护
PCR仪器使用频率较低的情况下,需要在仪器关闭1小时后用软布或塑料纸覆盖以防止灰尘进入。仪器如果长期不使用,需要至少每隔半个月进行一次开机自检,运行20min左右。