PCR仪也叫基因扩增仪,它是利用PCR技术对特定基因做体外的大量合成,用于以检测DNA/RNA为目的的各种基因分析。
PCR技术原理
该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下,依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。DNA聚合酶以单链DNA为模板,借助一小段双链DNA来启动合成,通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合,形成部分双链。在适宜的温度和环境下,基因扩增仪,DNA聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3′-OH末端,并以此为起始点,沿模板5′→3′方向延伸,合成一条新的DNA互补链。
PCR反应步骤
分别是1.变性,2.引物退火,基因扩增仪价格,3.引物延伸。 所谓变性是将DNA加热至90-95℃变性,将双链DNA加热后转为单链DNA做为复制的模板. 而引物退火则是引物于一定的温度下(冷却至55-60℃)附着于模板DNA两端。 最后在DNA聚合酶的作用下(加热至70-75℃)进行引物的延伸及另一链的合成。
PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。PCR仪器温度控制性能的影响因素:
一、PCR仪器之间的差别对实验结果的影响。如前所述,pcr基因扩增仪,没有任何两台PCR仪器的温度控制是一模一样的。相对于预设的温度模块温度总是偏高或偏低,就是同一模块不同的孔之间,温度有时也会不一样,相差可能达几摄氏度之多。一些PCR仪温度控制性能的不足造成的后果是:当PCR仪的模块温度在升温时,温度过冲或不足,基因扩增仪厂家,不能准确的达到预设的平台温度。
二、温度控制技术的差别对实验结果的影响。导致PCR仪温度控制性能优劣的因素,首先是温度控制技术。调节PCR仪模块的温度,使其达到并保持在某一温度有很多方式。每一种方式都有优点和缺点。另外,这些技术被运用控制的水平对于温度控制的水准是很重要的,且有很大不同。大多数PCR仪器的温度控制性能是很差的。在单一或多传感器控制机制上的不同显而易见的引起了温度的不均一性。