PCR基因扩增仪主要作用原理与基本计量仪器相似,对计量要素要求较高,一旦失控,仪器将不能正常工作,所以PCR基因扩增仪也需要定期保养,基因扩增仪,依赖自然风降温的PCR基因扩增仪尤需注意。
在仪器的维护保养中需要注意的问题:
1)PCR基因扩增仪需要定期检测,一般半年至少一次
4)一般情况如能采用温度修正法纠正仪器的温度时,不要轻易打开或调整仪器的电子控制部件,必要时要请专业人员修理或利用仪器电子线路详细图纸进行维修。
根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,基因扩增仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时荧光定量PCR仪四类。
基因扩增PCR仪的使用方法:
PCR由变性--退火(复性)--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至90~95℃一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,基因扩增仪报价,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55~60℃,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在DNA聚合酶的作用下,于70~75℃,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,梯度基因扩增仪,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。