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荧光定量PCR样本加热块污染的问题

一个办法是运行背景校正反应板，当一个或多个反应孔连续显示出不正常的高信号，则表明该孔可能被荧光污染物。另外一种办法是在不放任何物品到样本块上的前提下，基因扩增仪报价，执行ROI的校正，当某个孔的信号明显高出其他孔时，则表明该孔被污染。

*样本加热块污染的步骤如下：用移液器吸取少量乙醇并滴入每个污染的反应孔中。 吹打数次。 将废液吸入废液杯中。重复以上步骤：乙醇三次，去离子水三次。确认反应孔中的残留液体蒸发完。

实时荧光定量PCR仪有哪些种类，各有什么特点？

答：目前市场上实时荧光定量PCR仪一般可分三类。

（1）金属板式实时定量PCR仪：

可容纳的样本量大，*特殊耗材，但温度均一性欠佳，梯度pcr基因扩增仪，有边缘效应，标准曲线的反应条件难以做到与样品完全一致。

（2）离心式实时荧光定量PCR仪：

能**标准曲线和样品之间反应条件的一致性。但可容纳样品量少，普通基因扩增仪，有的需用特殊毛细管作样品管，基因扩增仪，增加了使用成本。

（3）各孔独立控温的定量PCR仪：

各孔独立控温，适合多指标快速检测。但是上样不如传统方法方便，而且需要*特的扁平反应管，使用成本较高。