1. 用户自检:用户可常规运行多种诊断程序以检测仪器升降温速度和升降温精度
2. 基因扩增仪温度范围:4.0-99.9℃
3. 温度显示:仪器显示经计算机计算的实际样品温度,基因扩增仪报价,精准到0.1℃
4. 实际样品的平均升/降温速度: 1℃/秒
5. 样品基座升降温速度: 2.7℃/秒
6. 静态样品基座温度均匀性:±0.5℃,普通基因扩增仪,95℃计时后30秒
7. 基因扩增仪温度准确性:正负0.5℃,35-100℃范围
8. 温度校正:符合美国国家标准技术局标准(NIST)
9. 热盖:维持105℃温度,满足无油操作PCR扩增
10. 重现性:达到设定温度的时间误差小于5秒
对于使用染料法的定量PCR反应,虽然有各种各样的PCR引物设计软件或者经验公式计算熔解温度(Tm值),但运用的公式不同、引物序列不同,Tm值的差异会很大。
引物的熔解温度决定了退火温度。而且模版中碱基的组合千变万化,梯度基因扩增仪,对于特殊片断,经验公式得到的数据不一定能得出准确的结果,退火温度细微的差异对结果都可能产生决定性的影响,因而“摸条件”一度是让人很头疼的问题。梯度PCR的出现部分解决了一些问题——在反应过程中每个孔的温度控制条件可以在指l定范围内按照梯度变化,根据结果,基因扩增仪,一步就可以摸索出较适合的反应条件。
不单退火温度,连变性温度和延伸温度都可以优化——对于多种聚合酶混合酶扩增如Invitrogen、Clontech、Promega的多数高保真Taq酶来说这个非常重要,因为Taq和校正酶的较l佳反应温度可能有显著差异,优化延伸温度就显得很重要。