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荧光定量PCR样本加热块污染的问题

一个办法是运行背景校正反应板，当一个或多个反应孔连续显示出不正常的高信号，则表明该孔可能被荧光污染物。另外一种办法是在不放任何物品到样本块上的前提下，梯度pcr基因扩增仪，执行ROI的校正，当某个孔的信号明显高出其他孔时，则表明该孔被污染。

*样本加热块污染的步骤如下：用移液器吸取少量乙醇并滴入每个污染的反应孔中。 吹打数次。 将废液吸入废液杯中。重复以上步骤：乙醇三次，去离子水三次。确认反应孔中的残留液体蒸发完。

实验室使用的PCR仪都是高精度仪器，一旦仪器出现一些温度或者检测上的小偏差，很可能对实验结果产生较大的影响，所以我们在日常使用PCR仪的时候，要注意对其的保养：

1. 仪器安置

仪器应安放在湿度较低、灰尘较少并远离水源和热源的地方，无腐蚀性气体或强磁场干扰。环境温度建议在18-35℃之间。仪器之间应保持50cm以上距离，降低仪器之间的影响。

2．样品台、热盖定期清洁

用95%乙醇配合棉签、无尘布等工具，清洁样品台。之后运行PCR仪，设定保持温度为50℃，约5-10min，pcr基因扩增仪厂家，让残余液体挥发去除。

另外，普通基因扩增仪，热盖也应该用酒精或纯水定期清洗，确保热盖清洁，温控性能良好。对于荧光定量PCR，基因扩增仪，清洁样品台和热盖的同时，去除灰尘等杂物，保证光路清洁，降低信号干扰。